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          超微量分光光度法的定義以及應用特點
        1. 發布日期:2020-03-11     信息來源:      瀏覽次數:1776
          • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關于超微量分光光度計的定義以及應用特點:

            定義: 超微量分光光度法是利用物質所特有的吸收光譜來鑒別物質或測定其含量的分析檢測技術。

            應用: 生物化學研究中廣泛使用的方法之一,廣泛用于糖,蛋白質,核酸,酶等的快速定量檢測

            特點: 靈敏、準確、快速和簡便,在復雜組分系統中,不需要分離,即能檢測出其中所含的極少量物質。

            一.超微量分光光度計的原理

            當光線通過某種物質的溶液時,透過的光的強度減弱。因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被組成此溶液的物質所吸收,只有一部分光可透過溶液。

            入射光 =  反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透過光

                    如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為“空白”去校正反射、分散等因素造成的入射光的損失,則:

            入射光 = 吸收光 十 透過光

             分光光度計進行樣品濃度測定的原理是根據朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律,

            A = ε b c

                其中,A ——為物質的吸光度;

                      ε——為物質的吸光系數;

                      b——為光路長度(光程);

                      c——為物質的濃度。

            二.超微量分光光度計的光譜范圍

            包括波長為380~780 nm的可見光范圍和波長為200~380 nm的紫外光范圍。不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。

               氘燈的發射光譜:氘燈能發出190~400 nm波長的光譜,可作為紫外光光度計的光源。氙氣閃光燈的發射光譜:氙燈能發出200~850 nm波長的光譜,可作為紫外-可見光光度計的光源。電源體積較小,采用脈沖閃光方式工作,閃光次數可達109次,壽命相對氘燈和鎢燈較長。

               鎢燈的發射光譜是:鎢燈光源所發出的380~820nm波長的光譜,光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

            物質的吸收光譜:如果在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液,此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗線,即光源發射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜。

            同物質的吸收光譜是不同的。因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。    

            以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結關于超微量分光光度計的定義以及應用特點。

             

             

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