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          實時熒光定量PCR技術在衛生應急中的應用
        1. 發布日期:2020-03-16     信息來源:      瀏覽次數:923
          • 實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCRReal-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR)的RNA通過聚合酶鏈式反應并實時監測DNA的放大過程,在擴增的指數增長期就測量擴增產物,因為擴增指數增長期測量值與特異DNARNA)起始量存在相關性,從而實現定量檢測。

            Real Time PCR的基本目標是測量和鑒別非常微量的特異性核酸,從而可通過監測CT值而實現對原始目標基因的含量定量。目前被普遍使用的多種常規PCR方法如各種凝膠電泳PCR法,終點熒光定量法或PCR-ELISA法叫做終點PCR法。實時熒光定量PCR法大的點是克服了終點PCR法進入平臺期或叫飽和期后定量的較大誤差,實現DNA/RNA的定量。

            普通PCR技術發明于1983年,而實時熒光定量PCR技術發明于上世紀九十年代并于1996年生產出了上第臺實時熒光定量PCR儀,實時熒光定量PCR技術得以實現的技術要素主要有熒光定量PCR試劑盒和實時熒光定量PCR儀,我熒光定量PCR試劑盒研發實力強大,生產廠較多,臨床診斷的品種如HBV/HCV及禽流感診斷試劑盒性能良、供應充足,基本實現產化。在豬流感病毒RNA核酸序列明確的情況下,利用現有的試劑研發平臺,人感染豬流感實時熒光定量PCR診斷試劑盒很快就會面世。實時熒光定量PCR儀由于技術含量,只有少數幾中企業有能力生產如西安天隆科技有限公司生產的TL-988系列儀器不但取得了發明、科學技術獎、重點新產品證書、醫療器械注冊證,而且被發改委確立為技術產業化示范工程2008年生物醫學工程專項,產品性能達到際先進水平,在乳品檢測行業*比進口儀器還[1-3]。實時熒光定量PCR儀應用廣泛,1999年開始,西方發達嘗試將PCR應用于臨床傳染病診斷、食品安全檢測以及血液篩查,目前已相當普及。20081213日中衛生部下發《衛生應急隊伍裝備參考目錄》(衛辦應急發[2008]207號),其中要求縣以上衛生應急隊伍建設中必須配備PCR儀和實時熒光定量PCR儀作為傳染病控制類裝備。

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